儀器描述 ：

STED顯微鏡應用壓制雷射形成donut以壓制螢光，產生比共軛焦顯微影像更高解析度的gated STED影像，其光學解析力至50 nm以下，是為不經運算之純光學超解析技術。STED技術中，解析度可隨壓制雷射之強度而變化。壓制雷射強度越強，可達到越高的解析度，搭配LightGate技術移除雜訊，同樣雷射強度下解析度可提升1.4倍。

主要特點：

· 多色高解析度觀察

· 多點位置應用及樣品大面積拼圖

· 光譜分析功能

· 弱螢光影像

· 螢光共振能量轉移 (FRET)

· 螢光漂白恢復術 (FRAP) 及光漂白螢光損失 (FLIP) 實驗

· 活細胞時間序共軛焦影像

· 螢光生命週期顯微影像 (FLIM)

· 超解析顯微影像 (STED)

儀器規格：

· 電動倒立型顯微鏡：Leica DMI 6000

· 雷射系統：

- 共軛焦系統：405 nm,及白光雷射系統WLL 470-670 nm連續可調

- 超解析系統：雙STED壓制雷射系統 (Depletion laser)：592 nm, 775 nm

· 螢光濾片：DAPI, EGFP, TexasRed

· 物鏡：10x, 20x Imm Corr 甘油鏡, 40x油鏡, 63x油鏡, 93x Glyc (STED)甘油鏡, 100x (STED)油鏡

· 感測器：兩組光電倍增管(PMT)感測器, 兩組光譜型高感度偵測器(HyD)

· DIC 浮雕相位差觀察模式

· 電動載物台

· LightGate偵測技術

· 3D gSTED 模組

· 活細胞觀察系統：方盤密閉式培養盒，加熱控制器，二氧化碳控制器，濕度控制用加熱器

· 控制軟體：LAS-X SP8

· 離線分析軟體：LAS-X SP8

使用注意事項：

· 建議使用1.5H (0.17 mm) 蓋玻片

· 建議使用Confocal專用玻璃底培養皿

· 若須使用STED超高解析圖像擷取，請使用精度高之蓋玻片或玻璃底培養皿

· 活細胞長時間培養觀察，可使用玻璃底培養皿或多孔盤

· 使用STED功能須避免會受592 nm雷射激發之染劑，例如DAPI或HOECHST等 (DAPI可使用TO-PRO-3, YOYO-3, DRAQ 5替代)

· STED Sample製備參考：Leica 原廠樣本製備建議 (超解析顯微技術有其限制，委託上機樣品須符合STED樣品備製需求)

· 以下功能應用不提供自行操作：

1. 非一般標準玻片型式之樣品，非乾式樣品，具有溶液或細胞培養液樣品。

2. 使用STED模組

3. Photon manipulation實驗

儀器放置位置：

國家生技研究園區 A棟 4樓, A407b室